Steriliseringseffektivitetsverifisering av autoklaver

Et av de mest essensielle instrumentene i et mikrobiologilaboratorium er sterilisatoren, med autoklaven (høytrykksdampsterilisator) som den mest brukte. I følge GB 4789.1-2016, bør laboratorieutstyr regelmessig inspiseres og/eller kalibreres (med inspeksjonsmerker), vedlikeholdes og betjenes for å sikre riktig ytelse og driftssikkerhet. Men har autoklaven din gjennomgått slike inspeksjoner? Og hvis du vil utføre verifisering, hvordan skal du gjøre det? I dag oppsummerer vi nøkkelmetodene for å verifisere steriliseringseffektiviteten til autoklaver.

Verifisering av autoklav steriliseringseffektivitet inkluderer generelt metoder som kjemisk indikator, maksimalt termometer, selvprodusert temperaturrør og biologisk indikator. Selv om disse metodene har lignende prinsipper - som ikke bekrefter om sterilisatoren når den nødvendige temperaturen under sterilisering - kan du velge en eller flere basert på laboratoriets spesifikke forhold.

1. Kjemisk indikatormetode

Prinsipp: Kjemiske indikatorer gjennomgår en farge- eller formendring under spesifikke temperatur- og tidsforhold. Denne endringen brukes til å bestemme om steriliseringsparametrene er oppfylt.

Et ofte brukt element i laboratorier er 3M autoklaveindikatorbånd, som endrer farge etter sterilisering. Båndet er laget av termosensitive kjemikalier, fargeutviklere og malingsmaterialer, trykt i et stripemønster på limtape. Den brukes direkte på utsiden av steriliseringspakken, med en minimumslengde på 5 cm. Trykk lett båndet for å sikre god vedheft og forsegling. Etter å ha blitt utsatt for 121 ° C i 20 minutter eller 130 ° C i 4 minutter, skal de diagonale hvite stripene på båndet bli helt svart. Hvis fargeendringen er ujevn eller ufullstendig, anses pakken ikke som riktig sterilisert.

2. Maksimal termometermetode

Prinsipp: Denne metoden bruker et kvikksølvtermometer som ikke går tilbake til en lavere temperatur når den er oppvarmet, lik et tradisjonelt medisinsk termometer. Det indikerer den maksimale temperaturen som er oppnådd under sterilisering.

For bekreftelse, plasser kvikksølvtermometeret inne i en vannfylt Erlenmeyer-kolbe. Under sterilisering plasserer kolben i de øvre og nedre delene av autoklaven. Etter prosessen, sjekk om termometerets lesing samsvarer med den nødvendige temperaturen. Denne metoden kan bare verifisere temperaturen og kan ikke bekrefte om kravet til steriliseringstid ble oppfylt, så den representerer minimumsstandarden for autoklavverifisering.

3. Selvlaget temperaturrørmetode

Prinsipp: Denne metoden bruker visse kjemikalier som smelter og omkrystalliserer ved spesifikke temperaturer, med særegne krystallformer etter kjøling. Disse kjemikaliene er forseglet i små glassrør og plasseres inne i autoklaven. Etter sterilisering blir krystallformen undersøkt for å avgjøre om riktig temperatur var nådd.

Benzosyre brukes ofte, med et smeltepunkt på 121–123 ° C, som stemmer overens med autoklavens standard steriliseringstemperatur. Fast benzosyre er forseglet i små glassrør og plasseres i autoklaven. Etter sterilisering observeres tilstanden til benzosyre å bekrefte om måltemperaturen ble oppnådd. Som den maksimale termometermetoden, verifiserer denne tilnærmingen bare temperaturen, ikke varigheten av sterilisering.

4. Biologisk indikatormetode

Prinsipp: Denne metoden bruker ikke-patogene sporer av Geobacillus Stearotermophilus som indikatororganismer for å vurdere effektiviteten av termisk sterilisering. Disse sporer er svært varmebestandige, med resistens som ligner på patogene Clostridium botulinumsporer, noe som gjør dem til passende indikatorer for å verifisere steriliseringseffektivitet.

Biologiske indikatorer er tilgjengelige i tre former: Spore-suspensjoner, sporstrimler og integrerte spore-og-mediumrør. Disse er vanligvis plassert på fem steder i steriliseringsbeholderen: fronten, midten og baksiden av det nedre laget, så vel som midtpunktene i øvre og midtre lag. Etter sterilisering inokuleres indikatorene i Bromocresol lilla-glukose-peptonvann og inkubert ved 55–60 ° C i 2–7 dager. Hvis mediet forblir klart og uendret i fargen, ble sporer drept, noe som indikerer god sterilisering. Hvis mediet blir gult og grumsete, overlevde sporer, noe som antydet dårlig steriliseringsytelse. Både sporoppheng og sporstrimler følger den samme valideringsprosessen.

Kommersielle biologiske indikatorrør brukes også ofte i laboratorier. De inneholder Geobacillus Stearothermophilus -sporer og et forseglet glass ampull med vekstmedium. Rørene er plassert i hele steriliseringsbeholderen. Etter autoklavering knuses glass -ampulen for å frigjøre mediet, og røret inkuberes ved 56 ° C, sammen med en positiv kontroll. Hvis sterilisering er utilstrekkelig, vil overlevende sporer vokse og gjøre buljongen gul. Hvis sterilisering er effektiv, blir sporer inaktivert, og buljongen forblir lilla.

Bekreftelsesfrekvens

For øyeblikket er det ingen streng nasjonal standard angående hyppigheten av verifisering av autoklaveffektivitet. Laboratorier forventes å etablere sine egne verifiseringsplaner og holder seg strengt til dem. Tatt i betraktning både brukervennlighet og pålitelighet av resultater, anbefaler vi å bruke indikatorbånd i kombinasjon med biologiske indikatorrør, ettersom de tilbyr enkel drift og omfattende verifisering av steriliseringseffektivitet.

Merknader om sterilisering (ikke påkrevd for noen importerte helautomatiske autoklaver)
Når du bruker en høytrykksdampsterilisator, er det avgjørende å utvise all kald luft inne i kammeret når damp frigjøres. Først etter at all den kalde luften er fjernet hvis eksosventilen lukkes. Hvis det gjenstår luft, kan trykkmåleren indikere riktig trykk, men den faktiske temperaturen inne i kammeret kommer til kort. Jo mer luft beholdt, jo større er avviket mellom trykk og temperatur, noe som potensielt resulterer i ufullstendig sterilisering. (Dette observeres ofte under sterilisering av gjæringsmedier, der luftbobler forblir i små føringsrør - prøv å utmatte den kalde luften grundigere.)